由于牛血清营养丰富,贮存条件,因此在贮存和使用过程中容易产生以下问题:
1、改变培养液的pH值
牛血清的pH理论值为7.0~8.0,培养基在加入规定量的碳酸氢钠后(即达到细胞生长所需要的渗透压),再加入10%的牛血清,一般会使培养液的pH值发生改变。因此在使用过程中应注意pH的变化。
2、由于血清的营养成分丰富,非常适合细菌、真菌和支原体等生长,所以血清很容易受到污染。
3、血清在贮存解冻过程中会产生沉淀,这是由于血清中含有大量脂蛋白、纤维蛋白及多肽类物质,在-15℃冷冻保存解冻后就会自然形成沉淀,随着保存时间的延长,沉淀量会增加。因此在融化血清时一般应先在4℃放置使之解冻,然后放在室温使血清融化,以避免沉淀的增加。添加血清时应避免把沉淀加入培养液,否则由于沉淀的存在会使得所培养的细胞产生大量黑点,或者细胞表面将会覆盖一层油状物质,影响细胞的正常生长。为减少血清的损失,可以把有沉淀的血清收集起来进行离心处理,将上清液加入培养液使用。
一、胎牛血清的成分有下面几大类: 1.蛋白质类 包括白蛋白、球蛋白、α-巨球蛋白(抑制胰蛋白酶的作用)、胎球蛋白(促进细胞附着)、转铁蛋白(能结合铁离子...
细胞培养过程中,有多虐心就有多少需要注意的地方。作为生物学研究最基础的技术之一,细胞培养可以说渗透生命科学研究的方方面面。下面就将胎牛血清的作用、选择及保存...