1、首先根据您的细胞类型选择对应适合您的胎牛血清

　　2、胎牛血清使用注意事项：

　　(1)客户收到货后的第一时间需确认胎牛血清有无异常，如血清有没有出现融化情况、瓶口及瓶身有无出现碎裂、瓶口是否密封完整等情况。

　　(2)刚到货的血清，检查无异常后需及时放进-20℃冰箱中，避免反复冻融。

　　(3)血清融化方法：建议产品使用梯度溶解法，将血清从-20℃冰箱取出后，于2-8℃解冻过夜，并在此过程中不时轻轻摇动使之溶解均匀。

　　(4)血清不宜4℃甚至更高温度长期保存，切忌反复冻融，少量使用时建议分装冻存。（整个操作需在无菌操作台中进行，注意无菌操作。）血清结冰时体积会增加约10%，因此在分装血清时须预留一定体积，否则易导致分装瓶冻裂而发生污染。

　　(5)解冻后的血清沉淀物一般是由于血清中纤维蛋白及脂蛋白变性所造成，不影响使用。去除这些絮状沉淀物可以通过3500rpm离心5分钟去除，但不宜过滤去除，因为絮状物可能阻塞滤膜。

　　(6)血清灭活：Biochannel胎牛血清未进行过热灭活处理，客户如需热灭活血清，可自行操作处理。灭活条件为水浴温度56℃，30min。（请客户根据自身需求选择是否需要对血清进行灭活处理。）

　　(7)更换血清：我们建议客户在品牌血清替换时，先提取一部分细胞进行试用，并且按照比例替换血清，原血清与替换血清比例：3:1→1:1→1:3比例进行。

　　3、胎牛血清试用后常见的问题

　　细胞培养中出现的黑点是污染吗？

　　更换血清后发现细胞镜下观察有黑点，需要肉眼观察细胞培养液有无混浊的情况出现，其次镜下观察细胞中的黑点是否有游动。如果细胞被污染，微生物则会大量繁殖，培养基就会迅速变黄、变混浊。污染包括细菌污染、支原体污染等。

　　如果在镜下观察细胞，生长状态良好，与黑点出现前相比，没有任何变化，那么，黑点的出现可能与以下几种情况有关：

　　(1)细胞生长过老，破碎的细胞残骸;

　　(2)血清等级不足以维持良好的细胞生长;

　　(3)配制培养基的pH值偏高，不宜细胞生长;

　　(4)配制培养基的水质、容器不合格。

　　(5)培养原代细胞中出现小黑点，可能是原代组织中的杂质，多次传代可以消除。

　　更换血清后细胞出现死亡？

　　培养细胞的死亡原因有多种情况，常见的有以下几种：

　　(1)培养箱内温度波动过大；

　　(2)细胞在冻存或复苏过程中损伤；

　　(3)培养液渗透压不正确；

　　(4)培养液中有毒代谢产物堆积；

　　(5)胰蛋白酶消化过度；

　　(6)微生物污染；

　　(7)细胞在传代时未计数、计活率，可能导致细胞接种密度过低或过高不能正常铺瓶生长。

　　脐带间充质干细胞原代培养，细胞出现裂解死亡？

　　从细胞图片分析，客户在原代分离组织初期未见细胞爬出、或有零星细胞生长，未见细胞集落，建议客户对原代分离的操作步骤做排查。

　　为什么神经母细胞瘤培养，增殖慢，细胞易飘起？

　　该客户试用的是优级胎牛血清，根据神经类细胞的分型建议以及客户之前使用的是GIBCO澳胎血清培养，还是建议用客户试用特级胎牛血清对细胞进行培养。

　　为什么增加抗生素浓度后，细胞生长较慢？

　　乳腺癌细胞传至4代后增殖较慢，前期生长不错，增长1天左右可继续传代，细胞状态良好。增加抗生素浓度后，细胞生长较慢。

　　建议在排除污染情况下，降低抗生素浓度，从消化、传代是否过密、细胞状态不佳或老化等方面排查原因。

　　为什么细胞有大量聚团现象？

　　客户培养HT22鼠源神经细胞，特级血清培养，细胞生长正常，但总是细胞有大量聚团现象。

　　细胞生长容易聚团建议客户从传代时胰酶消化不当、细胞生长特性、血清是否存在批间差以及有无可能是轻度感染支原体等方面排除。排查了因消化原因、细胞特性等原因，疑似支原体导致的细胞聚团，添加了支原体清除剂，使用3天，聚团现象好转，停用就反复。建议继续使用支原体清除剂稳定一周后在停用观察细胞状态。