DMEM培养基的配制方法:
1、制备新鲜三蒸水或Millipore超纯水。
2、称取所需量的干粉培养基,加入约终体积一半的三蒸水中;若配制一个包装的培养液,在将整个包装的干粉倒入三蒸水后,需用水洗包装袋内面2次,倒入培养液中,以保证所有干粉都溶解成培养液。磁力搅拌或人工搅拌使之溶解。
3、根据包装袋上的要求补加所需量的碳酸氢钠;根据实验需要,添HEPES(5-20mmol/L)、谷氨酰胺和其他物质。
4、加水定容到终体积。
5、必要时用1 mol/L 盐酸和1 mol/L 氢氧化钠调节pH。
6、用无菌0.22um滤膜过滤除菌,分装于无菌血清瓶中,4℃冰箱保存。
7、配制好的培养液用前加入100U/mL青霉素和100U/mL链霉素,并根据需要加入血清(5%-20%)。