总蛋白含量是新生牛血清需要检查的指标。它属于化学成分的初步分析。有人统计过国产新生牛血清的蛋白含量1,在比较各产区各年份后,发现其含量在3.7%~4.4%之间。进口新生牛血清并不与之完全一致。因为国内的血清常采自奶牛,而国外的血清常采自肉牛。蛋白质是新生牛血清的主要成分,在细胞培养中起着维持渗透压、pH 值缓冲、物质运输和提供营养、促进细胞粘附等重要作用。在胎牛血清中,其总蛋白含量要更低。
血红蛋白含量也是新生牛血清一项重要检测指标。它是在血清运输和加工过程中细胞裂解释放到血清中的。之所以检测主要是由于牛血清中血红蛋白具有氧化性,其含量过高会引起羧基的产生和脂质过氧化反应,从而导致生产细胞受损,也会增加下游纯化处理的难度,给药品质量带来安全隐患2。有报道血红蛋白具有神经毒性。
BSA一般做为稳定剂被用于限制酶或者修饰酶的保存溶液和反应液中,因为有些酶在低浓度下不稳定或活性低。加入BSA后,它可能起到“保护”或“载体”作用,不少酶类添加BSA后能使其活性大幅度提高。不需要加BSA的酶加入BSA一般不会受到什么影响。对多数底物DNA而言,BSChemicalbookA可以使酶切更完全,并可实现重复切割。在37℃,酶切反应超过1h时,BSA可以使酶更加稳定,因为在不含BSA的反应缓冲液中,许多限制性内切酶在37℃下只能存活10~20min甚至更短的时间。而BSA可以结合缓冲液或底物DNA中抑制限制性内切酶活性的金属离子和其它化学物质。
一、胎牛血清的成分有下面几大类: 1.蛋白质类 包括白蛋白、球蛋白、α-巨球蛋白(抑制胰蛋白酶的作用)、胎球蛋白(促进细胞附着)、转铁蛋白(能结合铁离子...
细胞培养过程中,有多虐心就有多少需要注意的地方。作为生物学研究最基础的技术之一,细胞培养可以说渗透生命科学研究的方方面面。下面就将胎牛血清的作用、选择及保存...